2 resultados para 111202 Cancer Diagnosis

em Instituto Politécnico do Porto, Portugal


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O cancro é uma das principais causas de morte em todo o mundo. Entre as mulheres, o cancro da mama é o mais frequente. A deteção precoce do cancro é de extrema importância na medida em que pode aumentar as possibilidades de cura dos pacientes e contribuir para a diminuição da taxa de mortalidade desta doença. Um método que tem contribuído para a deteção precoce do cancro é a análise de biomarcadores. Biomarcadores associados ao cancro da mama, como o Recetor 2 do Fator de Crescimento Epidérmico Humano (HER2) e o Antigénio Carbohidratado 15-3 (CA 15-3), podem ser detetados através de dispositivos como os biossensores. Neste trabalho foram desenvolvidos dois imunossensores eletroquímicos para a análise de HER2 e CA 15-3. Para ambos os sensores foram utilizados, como transdutores, elétrodos serigrafados de carbono. A superfície destes transdutores foi nanoestruturada com nanopartículas de ouro. Foram realizados imunoensaios não-competitivos (do tipo sandwich) em ambos os imunossensores, cuja estratégia consistiu na (i) imobilização do respetivo anticorpo de captura na superfície nanoestruturada dos elétrodos, (ii) bloqueio da superfície com caseína, (iii) incubação com uma mistura do analito (HER2 ou CA 15-3) e o respetivo anticorpo de deteção biotinilado, (iv) adição de estreptavidina conjugada com fosfatase alcalina (S-AP; a AP foi utilizada como marcador enzimático), (v) adição de uma mistura do substrato enzimático (3-indoxil fosfato) e nitrato de prata, e (vi) deteção do sinal analítico através da redissolução anódica, por voltametria de varrimento linear, da prata depositada enzimaticamente. Com as condições experimentais otimizadas, foi estabelecida a curva de calibração para a análise de HER2 em soro, entre 15 e 100 ng/mL, obtendo-se um limite de deteção de 4,4 ng/mL. Para o CA 15-3 a curva de calibração (em solução aquosa) foi estabelecida entre 15 e 250 U/mL, obtendo-se um limite de deteção de 37,5 U/mL. Tendo em conta o valor limite (cutoff value) estabelecido para o HER2 (15 ng/mL) pode-se comprovar a possível utilidade do imunossensor desenvolvido para o diagnóstico precoce e descentralizado do cancro da mama. No caso do CA 15-3 serão necessários estudos adicionais para se poder avaliar a utilidade do imunossensor para o diagnóstico do cancro da mama.

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Breast cancer is one of the most prevalent forms of cancer in women. Despite all recent advances in early diagnosis and therapy, mortality data is not decreasing. This is an outcome of the inexistence of validated serum biomarkers allowing an early prognosis, out coming from the limited understanding of the natural history of the disease. In this context, miRNAs have been attracting a special interest throughout the scientific community as promising biomarkers in the early diagnosis of cancer. In breast cancer, several miRNAs and their levels of expression are significantly different between normal tissue and tissue with neoplasia, as well as between different molecular subtypes of breast cancer, also associated with prognosis. Thus, this these presents a meta-analysis that allows identifying a reliable miRNA biomarker for the early detection of breast cancer. In this, miRNA-155 was identified as the best one and an electrochemical biosensor was developed for its detection in serum samples. The biosensor was assembled by following three button-up stages: (1) the complementary miRNA sequence thiol terminated (anti-miRNA-155) was immobilized on a commercial gold screen-printed electrode (Au-SPE), followed by (2) blocking non-specific binding with mercaptosuccinic acid and by (3) miRNA hybridization. The biosensor was able to detect miRNA concentrations lying in the 10-18 mol/L (aM) range, displaying a linear response from 10 aM to 1nM. The device showed a limit of detection of 5.7 aM in human serum samples and good selectivity against other biomolecules in serum, such as cancer antigen CA-15.3 and bovine serum albumin (BSA). Overall, this simple and sensitive strategy is a promising approach for the quantitative and/or simultaneous analysis of multiple miRNA in physiological fluids, aiming at further biomedical research devoted to biomarker monitoring and point-of-care diagnosis.